期刊简介

               中国科学技术协会主管,中华医学会主办。本刊以广大风湿病学医师为主要读者对象,报道风湿病学领域领先的科研成果和临床诊疗经验,以及对风湿病学临床有指导作用、且与风湿病学临床密切结合的基础理论研究。本刊设有专论、论著、基础研究、临床研究、短篇论著、综述、讲座、病例报告、临床病理(病例)讨论、国内外学术动态等栏目。                

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  • 杂志名称:中华风湿病学杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:1007-7480
  • 国内刊号:14-1217/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:1998年,《中华风湿病学杂志》社被共青团省委、山西省卫生厅授予“青年文明号”荣誉称号期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中华风湿病学杂志2007年第01期

人可溶型破骨细胞分化因子的克隆原核表达及活性分析

杨彤涛;周勇;马保安;杨辉;范清宇;刘继中;陈苏民

关键词:破骨细胞分化因子, 基因克隆, 表达
摘要:目的 克隆人可溶型破骨细胞分化因子(sODF)基因,构建融合表达载体,在大肠杆菌中表达,并制备抗体.方法 采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法得到人可溶型破骨细胞分化因子(ODF)编码区cDNA,克隆入原核表达载体pGEX-4T-3,转化大肠杆菌感受态细胞JM109,0.1 mmo/L β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导后收集菌体蛋白,行十二烷基硫酸钠-多丙烯酰胺冻胶电泳(SDS-PAGE).纯化蛋白,体外诱导破骨细胞分化.结果 获得人sODF基因cDNA,构建原核表达载体pGEX-ODF,转化菌株可表达人GST-ODF蛋白,蛋白相对分子质量约为43 000,Western分析证实为GST-sODF融合蛋白.纯化后的表达产物体外培养人外周血淋巴细胞有破骨细胞形成,象牙片上有骨吸收陷窝形成.结论 成功获得人sODF基因cDNA,并在大肠杆菌中表达了人GST-ODF融合蛋白.成功表达的人sODF蛋白有诱导破骨细胞分化的活性,为该蛋白的进一步应用研究提供了依据.