期刊简介
中国科学技术协会主管，中华医学会主办。本刊以广大风湿病学医师为主要读者对象，报道风湿病学领域领先的科研成果和临床诊疗经验，以及对风湿病学临床有指导作用、且与风湿病学临床密切结合的基础理论研究。本刊设有专论、论著、基础研究、临床研究、短篇论著、综述、讲座、病例报告、临床病理（病例）讨论、国内外学术动态等栏目。
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首页>中华风湿病学杂志
- 杂志名称：中华风湿病学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1007-7480
- 国内刊号：14-1217/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：1998年，《中华风湿病学杂志》社被共青团省委、山西省卫生厅授予“青年文明号”荣誉称号期刊收录：上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
人白细胞介素-1受体拮抗剂或白细胞介素-10逆转录病毒载体的构建与体外实验
韩飞；张宁；唐福林
关键词：白细胞介素1受体拮抗剂, 白细胞介素10, 逆转录病毒科, 基因治疗
摘要：目的构建携带人白细胞介素-1受体拮抗剂(hIL-1Ra)或人白细胞介素-10(hIL-10)基因的重组逆转录病毒(rRV),体外转染兔滑膜成纤维样细胞,检测目的基因的表达水平与持续时间.方法提取人外周血单个核细胞总RNA,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增目的基因;酶切、连接目的基因与逆转录病毒载体pLXSN,筛出阳性克隆,经GP2-293细胞包装,收集病毒并鉴定;rRV-hIL-1Ra、rRV-hIL-10分别体外转染兔滑膜成纤维样细胞,RT-PCR测定目的基因mRNA表达水平与时间的关系.免疫组织化学与免疫印迹测定蛋白水平的表达与持续时间.结果成功构建了携带hIL-1Ra或hIL-10基因的重组逆转录病毒,rRV-hIL-1Ra与rRV-hIL-10均能有效转染体外培养的兔滑膜成纤维样细胞,RT-PCR测定目的基因mRNA高峰均出现于转染后第5天左右.免疫组织化学和免疫印迹均检测到hIL-1Ra、hIL-10的表达.经G418筛选后的细胞中,hIL-1Ra的表达在转染后第30天内达高峰,至少持续60d;hIL-10的表达至少持续40 d.结论以重组逆转录病毒为载体可以成功地将hIL-1Ra或hIL-10基因导入体外培养的兔滑膜成纤维样细胞并实现稳定表达.
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